近年来，有关再生障碍性贫血（Aplastic Anemia，AA）中医辨证分型客观化、标准化的研究已有众多报道，不少学者对AA免疫学指标与中医辨证分型的关系进行了较深入的探讨[1]，但到目前为止，AA中医辨证分型的客观量化及其与AA免疫学发病机制的相关性分析尚未见报道。我们采用流式细胞技术对34例AA患者及34名健康人外周血的各项预设免疫学指标进行检测，应用统计学判别分析的方法，对众多免疫学指标进行筛选，建立了AA中医辨证分型的判别方程，对AA中医辨证分型进行客观量化，现报告如下。
资料与方法
临床资料
1.1 病例一般资料 全部病例来自2003年5月至2004年1月期间本院血液科病房及门诊就诊的AA患者共34例，年龄9-72岁，其中男19例，女15例；原发病例33例，继发病例1例；初治者6例，复治者28例；病程1-205个月。健康对照34名全部为门诊健康体检者，年龄20-59岁，其中男性12例，女性22例。根据中医辨证，将34例AA患者分为肾阴虚型14例，肾阳虚型10例，肾阴阳两虚型10例。
1.2 诊断标准 AA的诊断参照1987年全国AA学术会议修订的诊断标准[2]，AA中医证型的诊断参照中国中西医结合血液学专业委员会于1989年在大连会议上修订的AA辨证分型标准：
1.2.1 肾阳虚型 心悸、气短，周身乏力，面色苍白无华，唇色淡，畏寒喜暖，手脚冷凉，腰酸，阳萎，夜尿多，大便稀溏，虚胖或浮肿，多无出血，脉细无力，舌质淡，舌体胖，边有齿痕，舌苔白。
1.2.2 肾阴虚型 心悸,气短,周身乏力,面色苍白无华,唇淡，甲床苍白。伴有低热，手脚心热，盗汗，口渴思饮，大便干结，口腔粘膜、牙龈出血，鼻出血。皮肤有出血点或紫癜，妇女月经量多，脉细数，舌质淡。
1.2.3 肾阴阳两虚型 心悸，气短，周身乏力，面色苍白，并有肾阴虚及肾阳虚证，轻型者阴虚、阳虚均不明显，只表现气血两虚。
结 果
肾阳虚组：Y=-5.47 + 17.206×(CD3+HLA-DR+绝对值) + 0.245×[CD3+CD25+(%)] – 14.139×(CD3+CD25+绝对值)+2.841×(CD45RA+绝对值) + 7.46×[CD4+γδT(%)]
肾阴虚组：Y=-5.134 + 4.198×(CD3+HLA-DR+绝对值) + 0.563×[CD3+CD25+(%)] – 30.425×(CD3+CD25+绝对值)+4.241×(CD45RA+绝对值) + 2.899×[CD4+γδT(%)]
肾阴阳两虚组：Y=-4.69 + 0.958×(CD3+HLA-DR+绝对值) + 0.163×[CD3+CD25+(%)] – 0.76×(CD3+CD25+绝对值)+4.75×(CD45RA+绝对值) + 0.352×[CD4+γδT(%)]
通过判别验证检验，肾阳虚组的判别正确率为88.8%，肾阴虚组稍低（78.6%），也接近80%，肾阴阳两虚组的正确率最低（30%），辨证分型的总判别率为76.5%。使用时，我们可以将AA患者的免疫指标值直接代入判别式，计算评分，得分最高的一类就是该患者的中医证型。
讨 论
AA在中医学属于“虚劳”、“血虚”、“虚劳亡血”的范畴。肾虚是导致气血不足、生血障碍的根本原因，并贯穿于AA的始终。肾精亏损，不能滋生血液，致血枯髓空，是AA发病的病因病机。故七十年代以来，AA以肾虚立论进行辨证治疗，结合现代医学的治疗成果，使中西医结合治疗AA获得令人满意的疗效。辨证论治是中医学的精髓，证是机体功能状态的综合反应，是辨证论治的核心。中医证型客观化研究是中医现化化研究中的重要组成部分，也是目前科研研究的难点和热点之一。已有不少学者从多角度对AA辨证分型进行了客观化的探讨[1]。
AA的发病机理尚未完全阐明，大量的研究证实，免疫介导的造血抑制是AA常见的病理机制，与异常免疫有关的细胞毒T淋巴细胞(CTL)的活化和增殖是引起AA造血功能衰竭的重要原因[3-4]。CD25、HLA-DR分别是T细胞激活的早期和晚期标志[5]。CD45RA/RO分别在初始T和记忆T细胞优势表达，已有报道指出CD45RA/RO在系统性红斑狼疮活动期、多发性硬化症及银屑病等免疫性疾病患者中表达显著增高[6~8]，其比例变化反映出体内免疫系统活化的程度。γδT细胞是大颗粒淋巴细胞，具有很强的NK样细胞毒功能，其作用机制与NK、CTL等细胞相似，活化的γδT细胞还分泌IL-2、IL-6、 IFN- γ等细胞因子而影响造血[9]。总之，AA患者免疫功能异常，AA患者中呈活化状态的CD25+及HLA-DR+ T细胞增多，分泌造血抑制因子，通过直接的细胞毒作用或通过其分泌的抑制因子而抑制造血，最终导致造血功能衰竭，可能是AA免疫病理机制的生物学基础。
本研究从中医辨证分型出发，通过临床辨证确定AA患者的中医分型，并利用统计学方法，将53项免疫学指标纳入研究范围，从而筛选出与中医证型最相关的CD45RA+绝对值、CD3+CD25+绝对值、CD3+CD25+（%）、CD3+HLA-DR+绝对值和CD4+γδT等5个免疫学指标，并以这5个免疫学指标为自变量，辨证分型为应变量建立了AA辨证分型的判别方程，对中医证型从免疫学角度进行量化，使临床辨证更具客观性、准确性和可操作性。AA辨证分型的判别方程中的5个免疫学指标均与AA的免疫学发病机制相关，这说明中医辨证分型确有其客观物质基础。我们注意到，在AA中医证型的判别方程中，肾阴阳两虚型的判别正确率最低（30%），这也反映出肾阴阳两虚型的某些症候在临床实践中较难把握，受主观影响比较大，但是否肾阴阳两虚型不能量化，因研究病例尚少，我们将在下一步扩大病例数的基础上进一步完善AA中医证型的判别方程，探讨其中的原因。
本研究应用判别分析方法建立了AA中医辨证各型判别方程，使AA辨证分型得以客观量化，具有临床实际意义；筛选出与辨证分型最相关的5个免疫学指标，与AA免疫学发病机理关系密切，这就为AA中医辨证分型找到了客观依据和物质基础。这也从一定程度上为AA的免疫学发病机制提供了中医临床辨证证据的支持，同时也反映出中医辨证与AA免疫学发病机制的内在关系。