核酸检测成为诊断病毒的主要依据，如何保证检测结果的准确性，需要从标本采集到检测的每一个环节，需要按照流程进行严格的操作，保证检验结果的准确性，避免假阳性的出现。
原因分析
核酸检测是病原学检测的一个金标准，影响检测结果影响因素很多，检验前，检验中，检验后质量控制很关键。如何把控每一个环节，需要每一个参与核酸检测医务人员都需要按照操作规范完成。
核酸检测假阳性可以将原因分以下几种情况：
检测前：主要包括采样环境的准备、采集人员防护要求、标本采集留取，转运等，每一个环节出问题都会影响检验结果的质量。
检验中：实验室环清洁消毒、检验人员操作规程、试剂的准确性等都需要按照规范进行操作。
检验后：从事核酸检测人员资质、核酸报告的研判以及核酸报告的审核、以及标本的无害化处理、实验室的终末消毒等。
应对措施
01
采集环境要求
采样点应当为独立空间，具备通风条件，内部划分相应的清洁区和污染区，配备手卫生设施或装置。采样点需设立清晰的指引标识，并明确采样流程和注意事项。设立独立的等候区域，尽可能保证人员单向流动，落实“1米线”间隔要求，严控人员密度。
02
采样防护要求
采样人员防护装备要求：N95及以上防护口罩、护目镜、防护服、乳胶手套、防水靴套；如果接触患者血液、体液、分泌物或排泄物，戴双层乳胶手套；手套被污染时，及时更换外层乳胶手套。每采一个人应当进行严格手消毒或更换手套。
03
标本转运
1、标本包装。所有标本应当放在大小适合的带螺旋盖内有垫圈、耐冷冻的标本采集管里，拧紧。容器外注明标本编号、种类、姓名及采样日期。将密闭后的标本放入大小合适的塑料袋内密封，每袋装一份标本。
2、标本送检。标本采集后室温放置不超过4小时，应在2-4h内送到实验室。如果需要长途运输标本，应采用干冰等制冷方式进行保存，严格按照相关规定包装运输。
3、标本接收。标本接收人员的个人防护按采样人员防护装备执行。标本运送人员和接收人员对标本进行双签收。
4、标本保存。用于病毒分离和核酸检测的标本应当尽快进行检测，能在24小时内检测的标本可置于4℃保存；24小时内无法检测的标本则应置于-70℃或以下保存（如无-70℃保存条件，则于-20℃冰箱暂存）。应当设立专库或专柜单独保存标本。标本运送期间避免反复冻融。
05
实验室清洁消毒
使用0.2%含氯消毒剂或75%酒精进行桌面、台面及地面消毒。消毒液需每天新鲜配制，不超过24小时。（卫健委推介）
06
实验室人员要求
实验室检测技术人员应当具备相关专业的大专以上学历或具有中级及以上专业技术职务任职资格，并有2年以上的实验室工作经历和基因检验相关培训合格证书。实验室配备的工作人员应当与所开展检测项目及标本量相适宜，以保证及时、熟练地进行实验和报告结果，保证结果的准确性。
07
试剂的准确性
所有市面上使用的检测试剂必须由国家食品药品监督管理局审批，才能用于临床诊断使用，截止2021年2月5日国家药品监督管理局网站显示关于核酸检测试剂盒和相关设备。
应当选择国家药品监督管理部门批准的试剂，并在选择标本采样管和核酸提取试剂时，使用试剂盒说明书上建议的配套标本采样管和提取试剂。
08
辅助性材料
PCR实验室的辅料指的是PCR实验中常用的一些辅助试剂和耗材，比如采样管、拭子、离心管、PCR管、吸头、移液器、无核酸酶水和试管架等。
09
实验室分区
原则上开展新冠病毒核酸检测的实验室应当设置以下区域：试剂储存和准备区、标本制备区、扩增和产物分析区。这3个区域在物理空间上应当是完全相互独立的，不能有空气的直接相通。各区的功能是
1.试剂储存和准备区：贮存试剂的制备、试剂的分装和扩增反应混合液的制备，以及离心管、吸头等消耗品的贮存和准备。
2.标本制备区：转运桶的开启、标本的灭活，核酸提取及其加入至扩增反应管等。
3.扩增和产物分析区：核酸扩增和产物分析。
10
检测报告的出具和审核
核酸检测结果需要有检验者和审核者双人进行审核，并对检验结果进行综合判断，避免出现错误结果，只有双人核验才能保证检验结果的准确性，同时上传相应的网络信息平台（检测机构查询结果或者属地指定的核酸查询机构）。
11
实验室终末消毒处理
1、实验室空气清洁。实验室每次检测完毕后，可采用房间固定和/或可 移动紫外 灯进行紫外照射2小时以上。必要时可采用核酸清除剂等试剂清除实验室残留核酸。也可采用过氧化氢喷雾消毒。
2、工作台面清洁。每天实验后，使用0.2%含氯消毒剂或75%酒精进行台面、地面清洁。也可使用核酸污染去除剂。
3、生物安全柜消毒。实验使用后的耗材废弃物放入医疗废物垃圾袋中，包扎后使用0.2%含有效氯消毒液或75%酒精喷洒消毒其外表面。手消毒后将垃圾袋带出生物安全柜放入实验室废弃物转运袋中。试管架、实验台面、移液器等使用75%酒精进行擦拭。随后关闭生物安全柜，紫外灯照射30分钟。
4、转运容器消毒。转运及存放标本的容器使用前后需使用0.2%含氯消毒剂或75%酒精进行擦拭或喷洒消毒。
5、塑料或有机玻璃材质物品清洁：使用0.2%含氯消毒剂或过氧乙酸或过氧化氢擦拭或喷洒。
12
标本无害化处理
标本进行检验后需要按照规定进行无害化处理，避免因操作不当，导致标本的泄露，导致疫情发生或者感染病例出现。
PCR污染的主要原因
中南大学湘雅二医院检验医学科博士告诉丁香园，在核酸检测中，不合格样本通常是由于采样问题和采样用具问题导致的。
1、外源核酸污染 ：由于 PCR 的灵敏度非常高，理论上一个核酸分子的污染都有可能引起结果的假阳性，因此 PCR 标本采集最好使用无菌、无核酶的一次性器材，取材必须严格执行无菌操作，并小心防止混入操作者或受检者的毛发、皮屑等。密封运输和保存，不能在扩增区域进行标本的采集和处理，防止 PCR 产物的污染。
2、靶基因的降解 ：情况下，无菌采集的 DNA 样本稳定性较好，在室温下放置 8h 仍不影响检验，但如果操作不当、抽血容器不清洁、放置时间过长或有污染，DNA 链有可能发生断裂，使长片段的扩增变得困难。靶基因降解对于 RNA 样品影响更为严重，由于环境中大量 RNA 酶的存在，若样品保存、运输条件不佳或存放时间过长，模板 RNA 非常容易降解，造成假阴性。
3、PCR 抑制物：反转录反应和 PCR 反应均为酶促反应，任何可能抑制这些反应的物质都会影响检验的结果。
PCR污染的处理
1、标本污染生物安全柜的操作台造成局限污染时：立即用吸水纸覆盖，并使用含氯消毒剂或核酸污染去除剂进行喷洒消毒。
2、标本倾覆造成实验室污染时：保持实验室空间密闭，避免污染物扩散。立即使用润湿有0.55%含氯消毒剂的毛巾覆盖污染区。必要时（如大量溢撒时）可用过氧化氢加热熏蒸实验室，剂量为2g/m³，熏蒸过夜；或20g/L过氧化氢消毒液用气溶胶喷雾器喷雾，用量8ml/m³，作用1~2小时。
3、清理污染物时严格遵循活病毒生物安全操作要求，采用压力蒸汽灭菌处理，并进行实验室换气等，防止次生危害。
4、对于杀灭病毒来说，过氧化氢溶液已经足够了。通过其强氧化作用发挥灭菌作用，最终分解为氧气和水，对环境没有污染，也没有残留， 是一种非常好、可选择的冠状病毒消毒剂。 对于物品消毒，衣物消毒，一般可以采用喷雾喷涂、擦拭或浸泡的方式进行消毒，作用 20 分钟。通过这样的方式，新型冠状病毒能够被迅速灭活，起到良好的消毒效果。