摘要

猫传染性腹膜炎（ Felineinfectiousperitonitis,FIP ）是一种可以引起猫科动物多系统病变、甚至致死的重要传染病。因猫肠道冠状病毒（ Felineentericcoronavirus,FECV ）突变为猫传染性腹膜炎病毒（ Felineinfectiousperitonitisvirus,FIPV ）而发病，其中FECV携带率可达75%～100%，突变率高达2%～15%。目前国内尚未有商品化疫苗的报道，而且鉴别诊断复杂，误诊率较高，治疗方法局限，对应抗病毒药物还存在治疗成本高、周期长、无批号、动物接受度低等问题。因此，对感染FIPV的患猫的发病临床检测指标变化规律的研究及抗病毒药物的筛选具有重要意义。

通过对部分山西太原地区2021年～2022年6家宠物医院FIP患猫的血常规、血清生化以及其他临床检测指标分析总结，得出FIP鉴别诊断有以下关键：血常规常见指标WBC、NEU#和RDW约50%超过参考范围最高值，HGB、HCT和MXD#约50%低于参考范围最低值；血清生化常见指标AMLY和GLOB约50%超过参考范围最高值，CREA和A/G约50%低于参考范围最低值；SAA全部偏高且对抗生素不敏感；X光可见胸腹腔密度显著增高、肠道积气或积液、实质性器官结节或肿大；B超可见胸腹腔积液、淋巴结肿大、肝脾表面结节、肾脏实质回声增强等；病原学检测结果显示PCR敏感度和准确性较高。

为了进一步研究药物对FIPV的效果，通过不断完善FIPV体外培养条件，利用CRFK细胞成功培养出一株当地流行毒株，并命名为FIPV-TY1，分型结果表明该毒株为typeⅡ型，利用中药单体千金藤素、甘草酸对该分离毒株进行体外药物试验。试验结果表明，千金藤素的体外治疗作用在最大无毒浓度（ TC0 ）时病毒抑制率为160%，治疗指数（ TI ）为217.19，该药物在体外针对FIPV具有一定治疗作用和较高安全性，但是预防和中和作用不明显。甘草酸的体外治疗作用在TC0时病毒抑制率为80%，TI为35.27，中和作用在TC0时病毒抑制率为59%，TI为8.95和治疗作用在TC0时病毒抑制率为79%，TI为11.45，该药物在体外针对FIPV具有一定的抑制作用和安全性。综上所述，两者在体外均对FIPV有一定的抑制作用，千金藤素的体外治疗作用优于甘草酸。

本研究从血常规、生化、B超、X光等为FIP的临床鉴别诊断提供临床依据；通过对千金藤素和甘草酸对FIPV进行体外效果观察，千金藤素的体外治疗作用优于甘草酸，给动物临床用药试验提供理论支持；为后续中药单体药物抗FIPV的防治及抗FIPV新型药物的研发奠定基础。

猫冠状病毒生物型

猫冠状病毒感染在生物型上分为两类：一类为感染率高死亡率低的FECV，一类为感染率低死亡率高的FIPV。其中FECV感染的猫临床表现主要有精神沉郁、呕吐腹泻、食欲不振等症状或者没有任何症状，有症状的患猫经过对症治疗死亡率很低，治疗及时大多可以完全康复。但是，FECV可以长期存在于猫肠道中，随排泄物排至环境中，健康猫可以接触感染此病毒，猫群中该病毒感染率可高达75%～100%。FIP又分为三种生物型，干性传染性腹膜炎、湿性传染性腹膜炎以及混合型传染性腹膜炎。其中干性传染性腹膜炎无特异性临床症状，部分猫可见巩膜着色、葡萄膜炎，病毒侵入神经后会出现跛行、癫痫等症状。湿性传染性腹膜炎临床症状主要表现为腹泻消瘦、胸腹围增大、顽固性发烧、部分患猫出现呼吸困难、伸头喘息等症状。混合型传染性腹膜炎的临床症状囊括干性和湿性两种症状。

猫冠状病毒血清型

FCoV血清型分为typeⅠ型和typeⅡ型，并且普遍存在于两种生物型。Ⅰ型病毒具猫特有的Spike蛋白，而Ⅱ型是猫和CCoV之间的重组Spike蛋白。FCoV的typeⅠ型病毒在世界范围内占多数，而且可能更容易引起临床症状，但typeⅡ型更适于组织培养，可以高效感染宿主细胞，也有研究表明将typeⅠ型的Spike蛋白整合至typeⅡ型的Spike蛋白中可以使typeⅠ型容易感染宿主细胞。目前α属冠状病毒大多是以各自宿主细胞的氨基肽酶N（ AminopeptidaseN,APN ）作为黏附受体。冠状病毒的基因组进入宿主细胞内部第一步是识别宿主细胞膜受体分子，结合后启动入侵及膜融合。APN具有种属特异性，广泛存在于多种组织细胞表面，尤其在小肠微绒毛表面大量存在，其中猫的氨肽酶N（ fAPN ）可作为多种α属冠状病毒的感染受体。FCoV侵染细胞需要fAPN同时具备R1区和R2区所编码的残基，而FCoV、CCoV和TGEV的Spike蛋白的S1区域的受体结合区域具有高度保守性。

结构蛋白功能

Spike蛋白是产生中和抗体的主要蛋白，同时在病毒颗粒与受体结合及入侵宿主过程中发挥重要作用，可对比病毒毒株之间的亲缘性和进化关系；Envelope蛋白主要影响病毒粒子的组装，是病毒粒子囊膜的主要成分；Membrane蛋白是病毒粒子中数量最多的结构蛋白，在病毒的组装和跨膜运输中起重要作用，又称为病毒跨膜蛋白；Nucleocapsid蛋白最重要的功能是结合和保护病毒基因组RNA，其与核内RNA分子结合形成病毒囊膜内核衣壳。

猫冠状病毒流行病学

研究表明，FECV和FIPV之间存在于由单核苷酸变异引起基因序列多态性（ SNPs ）和某段序列的插入或者缺失（ Indels ），同一猫群内的分离株间的差异很少超过1～2%，但不同区域的毒株之间的差异可高达20%。也有研究表明，猫接触FECV后是否会发生FIP取决于宿主对病毒的反应和宿主近期应激史的相关性，对FECV感染的免疫并不意味着对FIPV感染具有免疫。FIPV与细胞和组织结合紧密，只有在特殊情况下才可随粪便或尿液排出，所以很少有报道FIPV以水平方式从动物传播到动物，但将受感染组织的提取液或体腔积液通过多种途径接种到未感染的猫身上时，仍然具有高度传染性。

FIP大多发生在3～16月龄和10岁以上的猫身上，在美国平均有1～5%的猫舍或收容所里的幼猫会死于FIP。近年来，意大利科学家发现FCoV正在以2.4×10-2每代每碱基的变异速率进行突变，而HIV的突变速率也仅有10-3～10-5每代每碱基，这也证实了FCoV的高突变率的特性。曾有人提出FIPV会与其他疾病共同感染，但后续证实FeLV、FIV与FIPV感染并无相关性。

临床症状

湿性FIP最典型的症状是体腔积液和/或心包积液，胸腔积液时可见呼吸困难和心音浑浊；腹腔积液时可见外观腹围增加，触诊腹部有液体波动感，积液呈现不同程度的黄色、澄清或略有浑浊，大多有较强粘性。另外少见渗出物进入*丸睾**包膜导致阴囊肿胀。由于免疫复合物或受感染的巨噬细胞和单核细胞迁移到滑膜上会导致滑膜炎。

干性FIP一般病程较长，胸腹部脏器、神经系统以及眼睛均有病变，一般不产生胸腹腔积液。尤其在肝、肾及肠系膜淋巴结及肠壁可出现不规则结节样肉芽肿病变。眼睛最常见虹膜炎，虹膜颜色变化或房水闪辉，甚至眼前房出血，视网膜血管成套状聚集，偶尔伴有化脓性肉芽肿。FIP的神经系统症状常因中枢神经系统的位置和严重程度而异，常见精神状态的改变、背部感觉过敏，其次可见共济失调、后肢运动障碍、眼球震颤，以及癫痫、跛行和瘫痪等症状。少数猫会出现非瘙痒性皮肤损伤，呈边界清晰的皮内丘疹。混合型FIP大多是由湿性FIP和干性FIP互相过渡的阶段，多发生在疾病发展的晚期，常会出现免疫系统崩溃，导致患猫突然死亡，或者患猫病情突然变型。

急性期蛋白

急性期蛋白（ Acutephaseprotein,APP ）是机体需产生以防御为主的非特异性反应时产生的某些蛋白质。猫常表现血清中的α-1-酸性糖蛋白（ α-1-Acicglycoprotein,AGP ）、淀粉样蛋白A（ SerumamyloidA,SAA ）、结合珠蛋白（ haptoglobin,Hp ）等。通常在猫感染FIPV时APP大多有升高，其中AGP相对于SAA和Hp敏感性和特异性更高。但是临床上常使用SAA，因为SAA在机体感染病原体后几小时内开始升高，直到病原体清除后迅速降至正常水平，对于猫来说SAA相较于AGP的反应更快。但是AGP在FIP发病前会有明显升高，所以在猫血清或者体腔积液中检测AGP可以监测生活在暴露环境中健康猫的发病状态。FIP与猫血清中对氧磷酶-1（ Paraoxonase-1,PON-1 ）的灵敏度极高，但是特异性有待提高。

组织病理学

患*肉猫**眼可见消瘦，胸腹围膨大，尸检过程中可见不同程度的体腔积液和心包积液，体腔内可见黄色至透明的黏稠浑浊液体，杂有灰白色纤维素絮片。腹部实质性器官体积增大，浆膜表面覆有呈现白色或灰白色的颗粒状渗出物，内部和表面出现质地较硬的肉芽肿，或出现弥散坏死灶。肠系膜粘连，肠壁增厚且有大小不一的肿块。脑膜出现纤维素状渗出液，伴有或不伴有脑室扩张和积水。

组织病理中，可见组织内出血严重，炎性细胞浸润明显，部分组织细胞核浓缩坏死、甚至溶解，细胞内可见空泡病变、甚至细胞破裂、组织结构损坏，肠道肌层出血、炎性细胞浸润，肠道粘膜纤维脱落。偶见脑膜、室管膜或脉络丛中有化脓性或单核细胞性脑膜炎，部分病例可见眼房渗出液，视网膜以及视神经等有单核细胞浸润。免疫组化染色法是检测FIP的金标准，可以通过最直观的方式显示受损组织中是否存在病毒。但是，由于侵入性较强，所以临床上主人接受程度有限。

甘草酸的抗病毒作用

甘草酸（ Glycyrrhizin,GLY ）是甘草中最主要的活性成分，别名甘草甜素、甘草皂苷，是一种环三萜类皂苷，分子式为C42H62O16，本品为白色结晶，易溶于热水、乙醇，味极甜。甘草是莲花清瘟颗粒、清肺排毒汤、宣肺败毒颗粒、化湿败毒颗粒，金花清感颗粒等中药方剂中重要的一味中草药，以上方剂均对人冠状病毒有一定效果。Utsunomiya等对甘草酸苷影响A2型流感病毒小鼠的机制进行了研究，结果表明其抗流感病毒活性是通过刺激T细胞产生γ-干扰素实现的；甘草酸是羟基类固醇脱氢酶的*制剂抑**，被证明可以抑制H5N1复制和促炎基因表达。研究表明，甘草酸对乙肝病毒、丙肝病毒、艾滋病毒、流感病毒和疱疹病毒等均显示出体外*伤杀**活性。还有研究表明甘草酸二铵对猪δ冠状病毒（ PDCoV ）具有抗病毒活性，在LLC-PK1猪肾细胞中以剂量依赖的方式抑制PDCoV的复制。

总结

试验结果表明，全血血常规常见指标HCT低于28%，HGB低于93g/L，MXD#低于0.7×109/L，RDW高于18%，NEU#高于15×109/L；血清生化常见指标A/G低于0.4，GLOB高于51g/L，AMLY高于1000U/L；血清SAA偏高且对抗生素不敏感，为临床上猫传染性腹膜炎鉴别诊断提供临床诊断依据。