孙悟空使用瞌睡虫，一共6次。两次用的是真虫，这种活虫是一次性的，用完就没了。四次用的是毫毛变的——猴子毫毛可以变任何事物，他的毛是如意猴毛，想变啥就变啥，念个咒语或者吹口仙气就行，而且回收方便，浑身一抖，就能把毫毛全部收回。
第5回蟠桃宴偷仙酒，是孙悟空第一次使用瞌睡虫，首先把猴毛嚼碎，再喷出、念咒，叫声“变”，就变成了瞌睡虫。
第25回，五庄观偷吃人参果，交代了瞌睡虫的来历：在东天门与增长天王猜枚赢的。因为孙悟空把人参果大树推倒，师徒四人连夜逃走。临走时孙悟空说，我让他们睡一个月！就把瞌睡虫用在了清风、明月两个童子身上。之所以让他俩睡一个月，是孙悟空恼恨这两个童子出言无状，把师徒四人骂了个狗血淋头。镇元仙回来后，念动咒语，含一口水，喷在童子脸上，才解了睡魔。
第71回，在獬豸洞救朱紫国金圣皇后。孙悟空先变成苍蝇，飞到玉面狐狸头上，再拔一根毫毛，吹口仙气，叫声“变”，变作一个瞌睡虫，轻轻放在她脸上，然后瞌睡虫爬进鼻孔，玉面狐狸也就是侍女春娇很快就入睡了。
第77回，狮驼岭师徒四人被抓，又上了蒸笼蒸，孙悟空先用瞌睡虫把管烧火的十个小妖弄睡着，才救出师父逃走的。这次又交待了瞌睡虫的来源，但跟上一次有出入：做齐天大圣时，在北天门与护国天王猜枚赢的。现在还有十二个，本来准备用掉十个，留两个做种。结果有一个小妖睡不稳，老揉鼻子打喷嚏，于是孙悟空又加了一个，所以还剩下一个。
第84回，灭法国国王要杀一万个和尚，为了惩治国王，孙悟空把从国王到宫女，以及大小官员，连夜都剃了光头。这次孙悟空把右胳膊上的毫毛都拔了下来，吹口仙气，叫声“变”，变成了无数瞌睡虫。
第86回，隐雾山折岳连环洞，孙悟空先变了蚂蚁，再拔了一把毫毛，口中嚼碎，轻轻吹出，暗念咒语，都变做瞌睡虫，然后把瞌睡虫抛到众妖脸上。小妖很快都睡倒了，只有老妖睡不稳，不断揉头搓脸，捏鼻子打嚏喷，于是悟空又给他加了一个，很快老妖也睡着了。猴子把老妖四马攒蹄捆起来，用金箍棒背出去，被八戒一钯筑死，现了原形，是个艾叶花皮豹子精。一洞睡着的小妖，被猴子和老猪放火尽数烧死。