猪伪狂犬病病毒变异株疫苗曾在很长的时间内占据行业关注的热点，多家企业与科研院所对其展开了研发。2019年，普莱柯猪伪狂犬病病毒变异株（HN1201-ΔgE株）灭活疫苗“普伪净”上市，被称为国内首个获批的猪伪狂犬病变异毒株的疫苗，引起了行业专家及相关同行的热议。
为什么会是普莱柯拔得头筹？普莱柯在变异株猪伪狂犬病疫苗的研发中经历了怎样的历程？普伪净本身还拥有哪些突破？针对这些业内关心的问题，国家兽用药品工程技术研究中心科研管理部主任、普伪净项目负责人之*肖一**燕博士接受了媒体采访，进行了详细解答。
肖燕表示，实际上受当时经验所限，对于该疫苗的研发和申报并不是一帆风顺的，甚至在最开始获得毒株的时候都没有立即考虑去做疫苗。如今成果的获得应归功于研发人员日以继夜的努力和普莱柯全公司上下一心的投入与支持。同时，她还表示，克服重重困难终于面世的“普伪净”将不负众望，为国内伪狂犬的净化提供匹配的工具。其可激发优秀的免疫效果，对猪伪狂犬病变异毒株和经典毒株的攻击均可产生完全的保护，符合中国本土市场的需求。
国家兽用药品工程技术研究中心科研管理部主任、普伪净项目负责人之*肖一**燕博士
问：许多单位都在紧锣密鼓地开发变异株伪狂犬疫苗，为什么普莱柯可以第一个拿到新兽药？
肖燕：在国内率先拿到猪伪狂犬变异毒株之后，我们并没有马上启动这个项目。因为国家中心没有人工改造病毒基因的平台，同时国内从事猪伪狂犬病毒研究的科研单位有很多，平台也很成熟。
搁置不久之后，通过内部筛选发现，国家中心的一位博士在前期毒种改造上有丰富的操作经验，随即我们快速启动了这个项目，并联合国内从事人医的研究中心搭建了细菌人工染色体等基因操作平台。
在此基础上，国家中心专门成立了猪伪狂犬项目攻关小组，使上下游紧密配合，配套的动物房集中资源支持项目进展，公司层面也给予了非常大的人力、物力和财力支持。由于攻关小组成员比较年轻，为了研发进度，大家也牺牲了很多的节假日，所有这些措施快速推进了项目进展。
问：为什么选择了现在这个毒株（HN1201-ΔgE株）？
肖燕：亲本毒株HN1201的选择是基于对多株病毒株毒力的筛选确定的，单 gE基因的缺失是基于最大限度保留生产用毒株的免疫原性确定的。
问：除了毒株以外，普伪净在其他工艺上是否也有突破？
肖燕：对于疫苗来说，除了毒株以外，最重要的部分就是佐剂，既要保障疫苗的安全性，又能使效果达到极致。为此，我们筛选了一种双相佐剂。
在抗原生产工艺上，培养出来的抗原含量比较高，灭活前病毒含量达到108.5TCID50以上。通过抗原纯化，更好地去除了细胞碎片等，保障了疫苗的安全性。
问：有报道显示经典疫苗无法对变异毒株产生完全保护的原因是因为一些毒力基因发生了改变。普莱柯是否有做相关实验验证到底是哪些基因改变导致的保护力下降？
肖燕：我们做过很多基因替换实验，目前发现可能还是与病毒的整体相关，个别基因的替换还不足以证明或体现其对毒力的影响。
问：普伪净的研发从立项到获得批签发前后经过了7年时间，这个过程中是否遇到困难，研发团队是克服的？
肖燕：在2011年拿到毒株后，我们最初想做的是活疫苗。在后来开展的过程中，我们发现灭活苗的效果也很好，所以就在开发活疫苗的同时也开发了灭活疫苗。灭活苗的研发和申报周期相对活疫苗会短一些，所以灭活苗就先上市了。
在当时的情况下，变异毒株对猪的致病性我们并不十分清楚，所以实验人员就轮流24小时盯着，看着猪发病从体温升高、呼吸道症状、到神经症状，然后死亡立即解剖、采集病料。
问：攻毒实验的标准是怎样的？
肖燕：通过肌肉注射和鼻腔滴入两种方法进行攻毒，我们发现滴鼻式攻毒病变症状会更典型、一致，所以采取了滴鼻攻毒方式，使用107.0TCID50剂量攻毒，127日龄的猪都会5/5死亡。
问：现在普莱柯在伪狂犬项目上已经推出灭活苗，是否还会再推出其他系列产品呢？
肖燕：我们现在先上市的是灭活疫苗，之后准备推出活疫苗和亚单位疫苗，同时也在尝试开发相关联苗。
问：许多企业都有伪狂犬苗产品，产品也不断在更新，普莱柯做伪狂犬疫苗的出发点是什么？是因为有新毒株的出现才花如此多精力去研发吗？
肖燕：疫苗生产用毒株是否与临床流行株匹配是重要原因之一。目前，经典株疫苗无法阻止流行株感染后gE抗体转阳已经成为共识，这对伪狂犬净化的*猪种**场来说是不能接受的。国外猪场在使用经典猪伪狂犬疫苗后实现了净化，国内也是因为出现毒株变异才重新开始关注该病，可以说只要有一个足够好且匹配的疫苗，按照现有的诊断方法和净化措施，是完全可以实现净化的。普莱柯在获得流行毒株之后，快速建立了成熟的研发平台，推出了一个符合中国市场需求的好产品。
《农财宝典》新牧网记者 王之娴