近期，四川省某地菜农在田间番茄上发现黄褐色斑点，并出现大面积的叶片干枯，于是向我们紧急求助，我们通过显微镜诊断、病原菌分离培养以及分子检测对其进行了准确鉴定。
一 、田间发病症状
茎杆感病，初期产生黑色斑点，病斑周围无黄色晕圈，后逐渐扩大，病斑易连成斑块，严重时可使部分茎部变黑。叶片感病，初期产生深褐至黑色不规则斑点，斑点周围伴有黄色晕圈，后期连接成片，最终枝条干枯。果实近成熟时病斑周围往往保持较长时间的绿色，病斑附近果肉略凹陷，病斑周围黑色，中间色浅并有轻微凹陷。
图1 田间发病症状
二、实验室检测结合田间诊断，确诊病害
我们对该病样叶片发病部位进行显微镜检查，发现有明显的菌溢现象，未发现有其他真菌孢子（图2）。同时提取病样组织DNA，然后利用细菌性斑点病的特异性引物进行PCR检测，确认引起该病的病原菌为丁香假单胞杆菌番茄致病变种（Pseudomonas sringae pv. tomato）（图4）。通过以上检测结果并结合田间症状，将该病害鉴定为番茄细菌性斑点病。
病原菌：该病原菌革兰氏染色为阴性，无荚膜，无芽孢；菌体杆状，直立或稍弯，大小为（0.5～1.0）μm×（1.5～5.0）μm，单细胞，有1至数根鞭毛，在NA培养基上菌落无色透明（图3）。
图2 显微镜观察-菌溢现象
图4 番茄细菌性斑点病特异性引物PCR检测结果
番茄细菌性斑点病特异性引物为BW_F/BW_R；M：BM5000 DNA Marker；1：FQ19062402；2：FQ19062402；P：阳性对照；N：阴性对照
三、引发番茄细菌性斑点病的原因
1、种子带菌引起幼苗染病
从发病果实中收集种子，致使种子表面带菌，或侵染健康种子，使种子内部带菌。该病原菌在干燥的种子上可存活 20 年，可随种子远距离传播。在条件适宜时，少量带菌种子能引发大量幼苗染病。
2、土壤带菌造成病原菌积累
番茄细菌性斑点病的病原菌可在土壤中存活至少 7个月，成为第二年初侵染源，当土壤营养不合理及温湿度相对较高时，病原菌可大量繁殖，引起幼苗发病。
3、温暖高湿的环境，有利于细菌性斑点病的侵染、传播
温度偏低、多雨，地块处在地势低洼、排水不良，关棚时间过长，浇大水等容易造成病害流行。
4、田间管理不善，加重了病原菌的扩展和蔓延
植株发病后，未及时拔除病株，或将病残体任意堆放，未及时清理出园，导致健康植株染病。此外，病原菌粘附在工作服或操作工具上，也能传播到健康番茄植株上，条件适宜时侵染。
四、综合防治措施
1、种子消毒，较少初侵染源
对于种子表面的病原菌，可先用冷水浸湿种子，再将种子放入 55℃的温水浸泡 30 min，或选用 1.05% 的次氯酸钠溶液浸种 20～30 min，或选用 3% 的中生菌素可湿性粉剂 600～800 倍液浸种 30 min，清洗干净后播种。对于种子内部的病原菌，可以采取干热灭菌的方法，注意干热灭菌的温度和时间，并进行小规模试验后，再进行推广应用。
2、土壤处理，减少菌源
育苗尽量选用新苗床或用营养土育苗。每平方米旧苗床用 3% 的中生菌素 5 g/m2，兑水 4～5 kg 浇施。夏天可进行闷棚处理，棚内土壤灌足水后覆膜，高温下晒 4～6 周；或者在定植前 1个月，用42%的威百亩水剂或50%的氰氨化钙颗粒剂对土壤进行熏蒸处理。应用土壤消毒剂，应该遵守技术操作规范。
3、田间管理，不容忽视
严格控制棚内或田间的湿度；田间湿度大时，尽量避免进行整枝、打杈等农事操作；工作服和操作工具可用75% 的酒精进行喷雾消毒；田间发现病株，应立即清除，收获后及时清除田间病残体及周围杂草，并在田外进行深埋，减少翌年的初侵染源。
4、科学用药，高效防控
发病初期及时施药，常用的药剂有 77% 的氢氧化铜可湿性粉剂 800倍液，或 50%的春雷王铜可湿性粉剂 1200倍液，或3%的中生菌素可湿性粉剂500倍液，或大棚蔬菜使用精量电动弥粉机配合格瑞微粉5号药30 g/亩进行防治。田间施药时，铜制剂应与其他药剂轮换使用，防治效果会更好，且避免抗药性的产生。
作者：李新宇，陈利达