你的细胞需要什么 (细胞系应用)

专家意见:The HAPI cell line has been misidentified (originally thought to be from rat but actually it is of mouse origin) and is listed as an unidentified cell line (i.e., perhaps not of microglial origin). Please check if this changes any of your results (e.g., reactivity of antibodies, comparison to other microglial cells) or discussion points.

译文: HAPI细胞系被错误地鉴定了(最初认为是来自大鼠,但实际上是来自小鼠),并被列为未鉴定的细胞系(即,也许不是小胶质细胞的来源)。请检查这是否改变了你的任何结果(例如,抗体的反应性,与其他小胶质细胞的比较)或讨论要点。

编辑解读:

报告使用细胞系研究的作者应说明他们获得细胞的时间和地点,酌情给出日期和提供细胞的研究人员、细胞系储存库或商业来源(公司)的名称。

作者还必须包括每个细胞系的以下信息。

对于新的细胞系,包括那些馈赠送给研究人员的细胞系,作者必须根据情况遵循人体研究或动物研究政策。伦理学声明必须包括:

- 机构审查委员会或伦理委员会批准的细节;以及

- 对于人类细胞,确认捐赠者、监护人或*亲近**的书面知情同意。

对于已建立的细胞系,方法部分应包括。

- 首次描述该细胞系的发表文章的参考文献;和/或

- 细胞系的储存库或公司,目录号,以及该细胞系是直接从储存库/公司还是从其他实验室获得。

作者应使用ICLAC交叉污染或错误鉴定的细胞系数据库(ICLAC Database of Cross-contaminated or Misidentified Cell Lines;https://iclac.org/databases/cross-contaminations/)检查已建立的细胞系,以确认它们没有被错误鉴定或污染。建议进行细胞系鉴定--例如,通过核型分析、同工酶分析或短串联重复(STR)分析。要求作者提供细胞系的鉴定证明(细胞的STR鉴定证书),并可于https://www.expasy.org/查验细胞是否被错用,以避免细胞系被交叉污染或错误鉴定,使用这些细胞可能导致研究结果错误、结果不可重复的严重后果。

关于细胞系(或株)的鉴定和管理:

下面为美国标准细胞库或细胞银行(ATCC)入库细胞的基本要求:

(1)培养简历:组织来源日期、物种、组织来源、性别、年龄、供体正常或异常健康状态,细胞已传代数等。

(2)冻存液:培养基和保护剂名称。

(3)细胞活力:冻融前后细胞接种存活率和生长特性(生长繁殖曲线,分裂指数等)。

(4)培养液:培养基种类和名称、血清来源及浓度。

(5)细胞形态:类型,如上皮或成纤维细胞等。

(6)核型:二倍体或多倍体,标记染色体有或无。

(7)无污染情况:包括细胞、真菌、支原体、原虫和病毒等。

(8)物种检测:检测同功酶,主要为G6PD和LDH,以证明细胞有无交叉污染。

(9)免疫检测:一两种血清学检测。

(10)细胞建立者:建立者姓名、检测者姓名。

延伸阅读:

细胞系遭到污染、特征鉴别错误极大地威胁着基于这些细胞而发表的论文的质量和研究发现的正确性。近年来,由于细胞系的交叉污染或错误鉴定导致的撤稿事件层出不穷,就是使得其成为学者、出版商、编辑们不得重视的问题。目前认为导致细胞系污染的五大要素为:源头问题、标记失识、同时操作多种细胞、试剂公用和耗材重复使用。

目前ICLAC最新公布的交叉污染(错误鉴定)细胞系数据库(The ICLAC Register of Misidentified Cell Lines)总共列出了576个被交叉污染(错误鉴定)细胞系 (8 June 2021, 更新)。其中531个被错误鉴定的细胞系,且目前找不到最初正确的细胞系库存(表1)。另45个被错误认定的细胞系(表2),但目前有找到正确的细胞系库存。

扫描二维码*载下**:

Table 1. Misidentified cell lines where no authentic stock is known

Table 2. Misidentified cell lines where authentic stock is known to exist

比较好的细胞系方案,细胞系选择

若您目前培养的细胞属于531个错误鉴定的细胞,请尽快停止项目。若细胞属于表2中43个细胞系,可先进行细胞STR鉴定,看是否有污染。如被污染了,需找到拥有正确细胞系库存的可靠供应商购买。

以下列出了部分被HeLa、HT-29、U-937等污染的细胞系。

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