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本期讲解一下实时荧光PCR技术。也就是我们常用到的RT－PCR、实时荧光染料SYBR Green 1 PCR技术、数字PCR等。
好的，首先我们来了解一下实时荧光PCR发展的历程。在讲这个枯燥乏味的原理性东西的时候，@cancy会加点料给大家提提神，比如巨头们的八卦新闻~（是不是讲到这个就兴奋起来了）
话说在九十年代末，二十年代初，一代巨头Cetus公司在温泉中分离到的嗜热菌中，纯化出了耐热的DNA聚合酶（Taq DNA聚合酶），这个是技术关键点，解决了以前在PCR扩增中，每个循环需加入不稳定的DNA聚合酶的难题。尽管在扩增技术上有了进步，可还有个问题没有解决：在这之前，扩增产物的分析仍需要打开反应管，而这往往会产生气溶胶，造成产物污染。毕竟PCR反应是一个高通量、高灵敏的过程。那么这个问题一直存在也不是个事啊，于是乎Cetus公司的老板员工就一起讨论，如何来解决这个问题。嗯？怎么有人打瞌睡呢？敲黑板，那我们来就来聊点别的吧~
我们知道美国人Mullis在一场旅行中看到交错的公路，获得梦幻边的设想“一段DNA复制”的想法。随后，这位大神发明了聚合酶链式反应，革命性PCR技术开始诞生。彼时，大神就职于一家叫Cetus的生物技术公司。
1984年，Cetus公司联合Mullis对PCR技术申请了专利保护，当然也通过了美国专利局的授权。然后Cetus就跟Perkin-Elmer公司成立了合资公司，根据协议，Perkin-Elmer占决定性的51%。而这51%很关键，在后面的宫斗中会有用。
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1991年，我们所熟知的另一老大哥登场了——罗氏。罗氏用3亿美金从cetus手里获得全权开发权，可能那个时候已经开始意识到PCR将来会大有作为吧。并将cetus改为旗下的一个部门。前面我们提到了84年的时候cetus公司与Perkin-Elmer成立了合资公司，而且Perkin-Elmer还占51%的决定权，所以Cetus一个说了不算，还得问问Perkin-Elmer，这家公司注意侧重于仪器方面。所以罗氏就不得不跟Perkin-Elmer达成协议，罗氏掌握方法专利，Perkin-Elmer保留了仪器研发专利。
后来Perkin-Elmer又收购了ABI，几经整合，Perkin-Elmer被拆分成了几个部门出去，有关PCR的技术专利就落在了ABI。如果说ABI掌握40多项PCR专利的话，罗氏就掌握800多项。PCR盈利的形式一片大好，大佬们岂有不想分一杯羹？但是罗氏、ABI这些老大哥能不护食，为这，官司不知道打了多少场。所以后面伯乐老大哥就在数字PCR独领风骚~
那专利垄断，其他人就没希望了吗，不是的呀，PCR技术专利期限是20年，20到期了，专利技术的大门就开了，凯杰呀，这些公司就是在这一时期受惠的。
咳咳、扯远了扯远了，上面说到以前的技术还不到位，扩增产物还需要打开反应管分析，后面科学家也攻克了这个难题，提出了闭管PCR，也就是今天的八联管，当然今天的技术更好，但是经典自然有他成熟的道理。
好吧，今天的内容就是这些了，关于RT－PCR、实时荧光染料PCR技术我们下期再讲哦