薄层色谱法 thin-layer chromatography；TLC
将固定相（吸附剂、载体或其他活性物质）均匀涂铺在平面板（如玻璃板、塑料片、金属片等）上形成薄层（厚度为0.25毫米左右）的色谱法。又称薄层层析法。
简史
1938年N.A.伊斯梅洛夫等在玻璃栽片上涂布氧化铝薄层分离多种植物酊剂中成分的实验是最早的薄层色谱法。此后，在20世纪50年代出现了以硅胶为吸附剂、煅石膏为黏合剂的硅胶薄层色谱法，并被成功地用于挥发油的分离。60年代，薄层色谱法基本成熟。
分离程序
将样品溶液用毛细管点在薄层板一端距底边1～1.5厘米处（称原点），薄层板点样端朝下置于密闭的容器（展开槽）中，加入适宜溶剂作流动相（展开剂）。
由于毛细管作用，展开剂沿薄层板向上移动，并带动样品中各组分向前移动，这个过程称为展开。由于各组分性质不同，在向上移动的过程中与固定相的相互作用强弱不同，因此移动距离也不同。展开一定距离后，即得到互相分离的组分斑点。
可用适当的方法使各组分在板上显示其位置，如组分本身有颜色，即可直接观察，否则可喷显色试剂或在紫外灯下观察荧光等办法确定斑点位置。通常用比移值（ ）表示组分移动的特性，其定义为：
在流动相、固定相和展开条件固定时， 值是组分的特性参数，可用来进行组分的定性鉴别。实际工作中也常将样品与已知纯物质同时展开，比较二者 值进行定性分析。
类型
根据分离机理可分为吸附薄层色谱法、分配薄层色谱法、离子交换薄层色谱法和凝胶薄层色谱法。吸附薄层色谱法使用最为普遍，常用的吸附剂为硅胶、氧化铝等。
定量方法
可分为洗脱测定法（直接定量）和原位扫描法（间接定量）。
①洗脱测定法。将展开后的组分斑点连同吸附剂一起刮下，用适宜溶剂将组分洗脱出溶出，并用适当的方法进行定量测定。
常用的定量测定方法为比色法和紫外-可见分光光度法，也可用电化学分析法等。
洗脱测定法的点样量要根据测定方法的灵敏度而定，一般要比薄层扫描法的点样量大得多，故常将样品点成长条状以增加点样量。
②原位（薄层）扫描法。将展开后的薄层板放在薄层扫描仪（又称光密度计）内，以一定波长的光照射，同时使斑点移过光路，由于斑点对光的吸收，可绘出峰形曲线，由峰面积与标准样品的吸收相比较而求出含量。
特点
操作简便，设备简单，除光密度计外，不需特殊设备，分离效果较好，时间较短，一块板上可同时分离许多样品。除低沸点物质外，各种无机和有机化合物都可进行分离。
应用
广泛应用于医药、生化、石油和化工等领域。样品用量一般为几微克至几百微克，是一种较实用、有效的微量分离分析方法。制备较大量（毫克级）的样品则使用较大、较厚的薄层板，将样品点成条带状。
高效液相色谱法中使用的微细颗粒也已用于薄层色谱法。用5～10微米的吸附剂制板，可得到较好的分离效果，此法也称为高效薄层色谱法。其优点是样品使用量少（只需纳克量样品），展开距离小，展开时间短。
摘自：《中国大百科全书（第2版）》第2册，中国大百科全书出版社，2009年