文献速递

流行病学研究表明，孕前，产前，出生和生命早期的因素与终生健康之间存在密切关系。Lifelines NEXT 是一个出生队列，旨在通过四代的设计研究对健康和疾病的影响的内在和外在决定因素，这个队列将嵌入 Lifelines 队列构成四代研究队列。Lifelines 队列是一项前瞻性三代人群队列，记录了居住在荷兰北部的 167,729 个人的健康状况。在 Lifelines NEXT，目标是招募 1,500 名怀孕的 Lifelines 参与者，并密切关注他们，她们的伴侣和她们的孩子，直到出生后至少一年。然后，按照 Lifelines 的程序对其身心健康进行长期随访。在 Lifelines NEXT 研究期间，将在 10 个时间点对母亲和儿童收集生物材料-包括母体和新生儿（脐带）血，胎盘组织，粪便，母乳，鼻拭子和尿液。还将在 14 个不同时间通过问卷调查收集有关医疗，社会，生活方式和环境因素的数据，并通过连接的设备收集连续数据。在怀孕期间及之后从母子中大量收集不同的（生物）材料，将提供将环境因素（包括母体和新生儿微生物组组成）与（表观）遗传，健康和发育结果联系起来的手段。Lifelines NEXT 获得的包括孕前的跨世代数据可用于识别 Lifelines 中的其他大家庭。

Keywords: Lifelines NEXT， Epidemiological，four-generation

Title: Lifelines NEXT: a prospective birth cohort adding the next generation to the three-generation Lifelines cohort study

DOI: 10.1007/s10654-020-00614-7

Journal: European Journal of Epidemiology [IF 6.529]

First Authors: Willemijn D. B. Warmink‑Perdijk

Correspondence: Willemijn D. B. Warmink‑Perdijk

Affiliation: Department of Midwifery Science, Amsterdam Public Health Research Institute, Amsterdam UMC, Vrije Universiteit Amsterdam, Van de Boechorstraat 7, 1081 BT Amsterdam, The Netherlands

Published: 2020-02-25

研究背景

在孕前，产前，出生和生命早期阶段的某些暴露或事件可能对个体的发育和疾病易感性产生终身影响。DOHaD（Developmental Origins of Health and Disease）研究表明母亲因素（例如生理和心理健康，生活方式）和环境因素可调节的发育进程。这种调控可以永久地改变儿童的生理学、代谢、表观基因和微生物，随后影响健康发展或增加易感性（慢性）疾病风险。这种调控可能具有跨代效应，不需要改变父母本的遗传信息。

目前出生队列对别与儿童健康和疾病易感性关系进行系统全面研究，尽管多个人类横断面研究和动物模型确定了免疫和微生物组对疾病发展的重要性，但少有纵轴队列包含全面的免疫学和微生物组数据，且少有出生队列中涉及三代或更多代。

Lifelines NEXT 数据集的另一个独特特征是收集在家分娩的生物样品。因为在荷兰，若母亲并发症风险低，有 13% 的孩子将在家分娩。这将提供一个机会研究在医院分娩和在家（有无医疗干预）分娩对新生儿发育的影响。先前已有研究表明分娩干预与几种免疫相关疾病的风险增加相关，目前具体机制尚未清楚，这个队列将提供很好的数据研究。

最后，与其他人群相比，Lifelines NEXT 将在很长一段时间大量母乳。与婴儿配方食品相比，这提供了资源以研究母乳中具有免疫功能的蛋白质，其所含大量胆固醇以及其脂质含量的具有不同分子结构。

Lifelines NEXT 是一个观察性预期出生队列，具有多达四代的跨代。Lifelines NEXT 将嵌入先前 Lifelines 队列研究。Lifelines 一项基于人群的前瞻性队列研究，涵盖了荷兰北部（格罗宁根，德伦特和弗里斯兰省）约 10％ 的人口，囊括 167,729 名参与者，目前，该队列中有 112,596 名参与者（67％）有已知的家庭成员，两代人都在队列的有 84,888 名（51％），三代都在的有 20,362 名参与者（12％）。队列最初，只有 8 岁以上的儿童才纳入队列中，且没有收集孕妇的任何数据，而 Lifelines NEXT 的启动正好填补这个空缺。

Lifelines NEXT 的研究目标：

• 研究生命早期或受孕前的跨代事件对幼儿健康的影响；
• 关联基因组、表观遗传学、血清学、代谢组学、微生物组、医学、社会和环境因素与生命早期健康。
• 从遗传家族传播中分离出非遗传传播评估（表观）遗传影响和印记。
• 孕前，产前，出生和生命早期的暴露与健康发展和（慢性）疾病易感性关系，感兴趣的主要风险因素包括微生物组、（表观）遗传、环境和生活方式因素。

研究方法

1.参与者招募

Lifelines NEXT 目标是纳入 1,500 名孕妇参与者，她们的伴侣也会邀请参加，她们的孩子将在出生当天就纳入出生队列中。

从 2016 年到 2021 年，Lifelines NEXT 将在荷兰北部招募孕妇，最好是从孕龄 12 周开始。通过助产士或妇科医生、Lifelines 网站、Lifelines NEXT 社交媒体（Facebook 和 Instagram上的公告）、Lifelines 通讯、与怀孕相关的活动和信息发布会招募合格的女性。意向者通过Lifelines 服务台联系，服务台的研究助手会提供有关 Lifelines NEXT 数据收集的更多详细信息（图 1），并说明知情同意程序。每位 Lifelines NEXT 参与者都将指派一名研究护士作为主要联系人，并在首次家庭访问时获得知情同意。父母双方都必须同意将他们的孩子也包括在 Lifelines NEXT 中。

图 1. Lifelines NEXT 研究的时间轴表明每个时间点的数据收集。a 仅适用于不在 Lifelines 研究的父亲。b 妊娠年龄（周）/儿童年龄（月）

2.收集和存储（生物）材料和数据的程序

母亲，父亲，孩子和家庭家庭环境的问卷调查数据和生物材料数据收集类型和时间点见图 1。数据收集最好在妊娠 12 周时开始。研究护士将四次拜访参与者以进行测试并收集（生物）材料。为了最大程度地减轻参与者的负担，研究护士、母亲自己或由产妇护理人员在参与者的家中进行样本采集。这种基于参与者的收样程序是参考 Lifelines DEEP 队列。为了让参与者顺利收集样品，Lifelines NEXT 提供了用于收集和存储（生物）样品的标准化手册。调查问卷将在规定时间内邮件收集。

• 粪便、母乳、尿液

参与者进行粪便和母乳采样和等分后，并将其与尿液样本先暂时存储在参与者家中的冰箱（-20°C）中，直到由研究护士收集为止。护士将冷冻的样品运送到 Lifelines 实验室和生物库，对此进行处理，然后在 − 80°C 下存储。

• 静脉血、脐带血

静脉血和脐带血由指定的专业人员采集，如果是含有 EDTA 的样品立即存储在家里或医院的冰箱中；血清则在室温下保存 30 分钟，然后冷藏；PAXgene 收集管的在室温下保存。血样最后将在实验室中进行处理并分成等分。

• 分娩生物材料

若在家分娩，胎盘活检临时冷藏（refrigerator）与阴道拭子冷冻（freezer）与参与者的冰箱中；在医院分娩则在医院收集，然后在 10 小时内转移到 Lifelines 实验室和生物库中。

所有材料均以条形码等分试样在 − 80°C 下保存，以备将来研究，但 4 个月收集的血斑应在室温下保存。所有数据都存储在安全的数据存储环境中。

3.母亲维度

在孕期和分娩后的第一年，要求参加活动的女性填写 11 份不同的问卷，以调查她们的身体健康，心理健康，生殖健康，与生活方式有关的行为和营养摄入以及社会和工作条件。在第一次家访，研究护士收集了静脉血样本。此外，在产前和产后第一年，参与者自己对母体生物材料进行采样和存储，并由研究护士进行家访时收集。

分娩期间，产妇护理人员将采集母亲的阴道拭子，粪便样本和血液。出生后立即按照标准化方案收集脐带血和胎盘组织，胎盘称重并拍照。产妇保健供应商提供详细的出生报告。

4.婴儿维度

婴儿出生后便纳入出生队列中。在随访的第一年，父母完成了八份有关孩子的健康，发育和行为的问卷。出生到满 1 周岁期间将收集七个粪便样本。婴儿 4 个月大时，研究护士将在家访是采集婴儿的足后血。婴儿 12 个月大时，将在格罗宁根大学医学中心（UMCG）的儿科门诊抽取静脉血。婴儿 4 个月和 12 个月时，收集口腔和鼻子样本以进行微生物组，DNA 和 RNA分析。研究护士还将使用 SCORAD 指数（cumulative objective scoring index for atopic dermatitis）评估湿疹的状况。婴儿 4 个月时，有专业护士采用 Single Occlusion Technique (WHISTLER) 方法测评婴儿的肺功能。

5.父亲维度

如果父亲已经入组 Lifelines 队列则无需再额外取样，反之，则加入 Lifelines 队列并按照 Lifelines 队列要求采集生物样品和数据信息。此外，在整个孕期期间，父亲将以 10 周为间隔完成三份不同的 Lifelines 基线调查问卷。

6.居家环境维度

通过测量参与者家中的空气质量以获得环境数据。在孕期 28 周和产后 4 个月家访时通过使用静电除尘器（EDC）收集空气中的灰尘，评估家庭的社区状况，同时通过调查问卷收集更多数据，包括有关房屋的居住条件，吸烟和宠物等情况。最后，通过邮政编码级别的地理编码数据来收集有关区域的空气污染数据。

优势与局限

Lifelines NEXT 将提供丰富的研究资源，这个独特的出生队列将可以解决有关环境暴露，社会因素，压力和早期营养对早期生命发展的影响的关键问题。虽然 Lifeline NEXT 队列由相对健康的人群组成，但（慢性）疾病易感性（不是罕见疾病）相关的研究也适用。

Lifelines NEXT 也可以研究母亲和儿童中的微生物组，代谢组学谱和（表观）基因组学变异和短期或长期健康状况的关联。动态的研究组织使得能依据研究需要添加其他度量。例如，所有时间点采集的粪便样品保存于甘油试管，以便以后进行活菌培养。婴儿出生第二周后开始佩戴设备获取连续测量数据。

卫生假说和出生婴儿表观遗传影响 (EPIIC) 假说，都表明了分娩和产后早期期间的因素可能影响新生儿免疫反应或导致不同的微生物群落和胎儿表观重塑异常现象。

Lifelines NEXT 将分析儿童的不同微生物群落宏基因组数据，以获得有关生命早期微生物生态系统发展及其与免疫，呼吸和代谢发育之间关系的全景视图，也有可能更详细地研究表观遗传特征的变化，如出生一年内与变态反应相关的基因的变化。

Lifelines NEXT 的另一个优势是可以研究免疫，微生物和代谢成熟过程与环境因素（分娩方式，母体和早期新生儿喂养方式，营养类型（如母乳或配方奶粉）室内室外环境（例如暴露于香烟烟雾，空气污染和变应原）药物使用和感染）关系。

Lifelines NEXT 也将关注病毒组。大多数肠道病毒是细菌（噬菌体）病毒，因此预计它们将成为影响人类微生物组的主要因素，并可能对人类生理产生影响。迄今为止，关于噬菌体在肠道生态系统发展中的作用及其与婴儿健康的关系的研究很少。通过这项综合分析将能对对病毒进行深入研究。

Lifelines NEXT 的局限，队列初期只有少量可用父亲的信息，后来为了满足对背景信息的需求，新参与者将参考 Lifelines 收集调察问卷。

由于为荷兰人口提供代表性样本，Lifelines 队列研究针对人口组成差异进行了调整，使低学历的参与者和吸烟者所占的比例较小。为了保持通用性， Lifelines NEX 也参照 Lifelines 要求招募参与者，但是这个人群研究的结论是可以广泛代表荷兰北部成年人群的。

M菌 · 笔记

Lifelines 官网：https://www.lifelines.nl/。可以向Lifelines申请已有研究数据，或者合作。

参考文献

Warmink-Perdijk W D B, Peters L L, Tigchelaar E F, et al. Lifelines NEXT: a prospective birth cohort adding the next generation to the three-generation Lifelines cohort study[J]. European Journal of Epidemiology, 2020: 1-12.

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