非洲猪瘟作为一个严重影响猪场临床生产的烈性传染性疾病,进入我国已经有18个月的时间,但是到目前为止,一些猪场在确诊非瘟方面依然没有头绪,尤其是一些中小规模猪场,由于非瘟与很多疾病在发病前期有相似性,给大家诊断和确诊带来困难,而且在诊断过程中,发病猪在排毒,引起很多潜伏感染和疑似发病猪,这就需要我们要快速确诊,及时处理。那么如何在24小时诊断确诊非瘟呢?仅仅凭借临床症状和剖检变化,不能真确及时确诊,这就需要我们引入实验室检测。
实验室检测看似离大家很远,尤其是中小规模客户,没有检测资源,或者不知道联系谁,只能依靠厂家和当地代理商。实际上,现在养猪生产越来越依赖这种快速、准确的诊断方法。下面我以非瘟实验室诊断为例,为大家介绍一下检测方法,便于养猪人了解。

一、非瘟常用检测方法
- 胶体金免疫层析 (GICA) 试纸条
- 普通PCR和荧光定量PCR
- 环介导恒温扩增 (LAMP)
- 其他血清学检测:ELISA抗体、荧光抗体等
目前猪场应用最多的非瘟检测方法就是荧光定量PCR和免疫胶体金(试纸条)两种方法,其他的检测方法,主要用于实验室科研使用。
二、荧光定量PCR
1、特点:
• 适用于全血、血清、新鲜组织以及口鼻拭子样品
• 可以快速制备样品DNA模板,适用于大量样品、时效要求高的初筛
• 整个检测时间相对较短,大约1h
• 操作人员需要经过相对专业的培训
• 设备、实验室投入相对较大
• 适用于有比较完备设施、样品类型单一的实验室。像大型养殖、屠宰企业
2、不足:对设备、人员、环境、试剂盒要求高
3、建议:我们在检测时尽量找专业的检测公司,而且越大越好,越专业越好,因为实验室的整体素质决定了检测结果的准确性,一般从送检到出结果,最快半天时间。

三、免疫胶体金(试纸条)
试纸条检测原理是将抗原或抗体结合在醋酸纤维膜载体上形成显色反应的一种技术方法,主要有层析法和渗滤法。
特点及不足:
胶体金检测方法可用血清、全血、粪便、奶水等样本。不需要特殊的仪器设备、可以实现单个标本现场检测。胶体金检测快速方便,但是误差太大,60-70,仅能判定猪场阴阳性。

四、非瘟实验室检测意义
1.判定“生”和“死”:实验室检测只要样本充足,可以直接判定和确诊,不仅仅是针对非瘟。
2.查找猪场威胁:通过定期抽检的方式,可以发现猪场弱阳性带毒猪,及时做到清除。
3.辅助“拔牙”:国内早期拔牙,没有配合检测的方式,基本都以失败而告终,因为表现临床症状的猪只,一般病毒已经感染了5-7天,而检测在病毒感染3天左右就可以通过唾液检测出来,利于拔牙。
五、采样注意问题
非瘟采样不同于其他疾病,建议大家采集唾液或者鼻腔试纸,如果像其他疾病一样采血,在采血过程中容易出现交叉感染和增加猪群应激。但是在唾液采集后,要注意及时送检,最好使用唾液保护剂,因为本来唾液中病毒含量少,且唾液中含有大量的酶,可以降解病毒核酸。

六、采样不仅仅局限于猪
- 饲料原料、车辆、物资风险
- 水源、土壤、环境通道是否被污染
- 人员的隔离和衣物、鞋底检测
- 猪场的传播原:苍蝇、蚊虫、鸟
以上样本都是可以通过荧光定量PCR检测到病毒,可以帮助猪场发现威胁,也可以帮助猪场增加复产成功率。

综上所述,随着疾病的复杂化,临床判定越来越难,而且耽误时间,实验室检测在猪病诊断上应用越来越广,不论规模猪场和农村散养户,都需要与时俱进,实验室检测不是猪场的专利。