(1)培养基灭菌
在培养基的制作过程中, 因为培养基配料富含有机物质，必然带有各种杂菌，培养基在分装完成之后应当立即实施高温高压灭菌这一工序，至少应该在当天，即不超过24小时以内完成灭菌这一工作。继代培养后被换下来的原培养瓶和生根苗种植后腾空的瓶子，这些旧培养基富含营养丰富的有机物都极易引起污染，应该立即清洗，不应放置在那里让杂菌滋生，以免传播扩展危及其它新制备分装好的培养基。常规方法是先用清水清洗干净然后放入髙压灭菌锅内高压高温灭菌。在高压锅内因密闭而使蒸汽压力上升,由于高压锅内蒸汽压力的上升，按照压力与温度成正比这一关系，而促使锅内水的沸点升髙。在每平方厘米1.1kg的压力下,锅内高压温度能够快速可以上升到110°C。在l20°C的高温条件之下可以快速彻底杀灭各种细菌以及它们高度耐热的芽孢。这些芽孢在水中能生存好几个小时。
特别必须指出的是，只有在完全排除了锅内的冷空气这一必须条件之下,使锅内全部都是热蒸汽，1. lkg/c㎡的压力才对应l20°C 。否则灭菌肯定是不会沏底的。灭菌的功能主要是温度，而不是压力。高压灭菌锅有小型的手提式和大型的卧式立式等多种型号，可按工作规模选用。大型效率高，小型的方便灵活。使用前应仔细阅读说明书,按要求操作。一般使用时应检查有无裂缝破损，盖子是否严密等。先在锅里加水,加水量应按说明书上要求，一般应该控制为加水到跟锅底的支架相平齐（手提式和立式）。在锅里放入要灭菌的容器。如试管应事先捆扎好以免散乱倒下,使培养基洁污棉塞。如全部为试管，可先在内锅四壁隔上防潮用牛皮纸,再装好试管,这样密集装入，上面应留有一定的间隙，不可完全装满,否则造成灭菌不彻底。装好后上面放几层牛皮纸或纱布、毛巾等，防止水蒸气从盖顶冷凝滴下或淌下打湿棉塞。加水后便可开始加热，然后盖上盖子,.双手同时将成对角线的嫘栓拧上,但不要一次拧紧，等全部螺栓拧好后，再逐个拧紧，以避免盖子偏斜漏气。
髙压灭菌锅的放气、加压有几种不同的做法，目的都是要使锅内物体均匀升温。排除空气,使压力与温度的关系相对应,保证灭菌彻底。
现介绍如下,可任选一种使用：