
鸡球虫病是当前危害养鸡业的主要疾病之一,本病分布广,感染率非常高,常发生在15~50日龄的雏鸡,几乎养鸡的地方都有球虫存在。就目前来说,对该病的控制主要有药物防治和疫苗接种两种手段,但化学药物由于耐药性和球虫疫苗价格昂贵等缺点,不易推广[1]。中草药不仅能直接杀灭病原体,而且能调节机体免疫功能,对防治球虫病是行之有效的疗法。近年来又有报道发现,中草药经过发酵后,除上述优点外,还可提高药效,提速疗效[2]。本课题旨在筛选最佳中药方剂及最佳发酵有益菌种的基础上,经过对中药的发酵,探明发酵中药对鸡球虫病的防治效果,进而研制出有效防治鸡球虫病的中药制剂。本研究研发成功后,为替代化学药物的应用防治鸡球虫病将开辟一条新途径,对我国养鸡业的健康可持续发展具有十分重要的意义。
1材料与方法
1.1试验药物与虫株、菌株
1.1.1试验药物 通过前期试验筛选出马鞭草、黄柏、郁金等设计组成了一种中草药方剂,研磨粉碎后按比例混合,过200目筛,供试验用。
西药:地克珠利,购于*安泰**市上高兽医防疫站。
1.1.2 试验虫株 试验前期已保存的E.tenella卵囊经复壮后计数后,接种备用。
1.1.3 试验菌株 酵母菌:产朊假丝酵母 乳酸菌:6133、7340 芽孢菌:纳豆 上述三种菌株均有山东宝来利来生物工程股份有限公司生物研究院分离得到。
1.2 试验动物与分组
1.2.1试验动物 购买220只健康的AA+肉鸡饲喂于经严格消毒的铁丝笼,经临床观察淘汰病弱和参差不齐的鸡只,留210只分组试验。
1.2.2试验分组 将210只13日龄健康的肉雏鸡随机分成7组,每组3个平行,每组10只,称重计算并记录初始平均体重,分组后各处理给药组分别用相应的药物进行治疗,直至试验结束,地克株利给药量为0.1 mL/只鸡·天,饮水。中药组为3 mL/鸡·天,相当于用药为1.5 g 生药/鸡·天,饮水,连用9 d。具体试验分组及给药方法见表1 。
表1 试验分组
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组别 |
处理 |
成分 |
给药量 |
|
Ⅰ |
不感染不给药 |
1 mL/L·10只鸡 |
|
|
Ⅱ |
感染不给药 |
3 mL/只鸡 |
|
|
Ⅲ |
西药 |
地克珠利 |
1.5 g/只鸡 |
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Ⅳ |
中药复方 |
马鞭草、黄柏、郁金等 |
- |
|
Ⅴ |
乳酸菌发酵复方 |
马鞭草、黄柏、郁金等 |
- |
|
Ⅵ |
芽孢菌发酵复方 |
马鞭草、黄柏、郁金等 |
- |
|
Ⅶ |
酵母菌发酵复方 |
马鞭草、黄柏、郁金等 |
- |
注:- 表示同上。
1.2.3 卵囊感染量 试验鸡于14日龄进行攻球虫卵囊,除不感染不给药组外,其它处理组鸡只每只鸡接种1.5×105个卵囊。感染后第8 d剖杀全部雏鸡,进行盲肠病变计分和卵囊计数。接种后每天观察记录各组鸡的临床表现,发病死亡情况、观察排泄物并进行粪便计分。在试验过程中死亡鸡只进行剖检,观察病变是否死于球虫病,并进行肠内容物检查球虫卵囊计数。

1.3试验用饲料 饲喂用六和雏鸡全价料510,购于山东乐林*合六**饲料(无球虫药),所用饮水器、料盘等均在80℃干燥箱中烘烤0.5 h以上,以确保外界环境无球虫。
2 中药对鸡球虫病治疗试验疗效评价指标
2.1临床症状 临床观察感染卵囊后逐日观察并记录各组鸡的精神、食欲、粪便变化和死亡情况,并对死亡鸡随时进行剖检记录。
2.2增重情况 于感染后第0 d、8 d早晨逐只空腹称重,记录并计算各组的平均增重。
2.3 疗效评价指标 病变和卵囊数观察:试验结束称重后,各组鸡全部扑杀,观察内脏病变,摘取盲肠,刮取粪便检查球虫卵囊数,冲洗盲肠,检查病变情况,记录病变和病变值。
2.3.1粪便记分: 0分,正常;1分,有少量血便;2分,中等量血便;3分,有许多血便;4分,无正常粪便。
2.3.2病变记分和病变值: 0分,肠道中无眼观异常;1分,肠道充血或增厚;2分,肠道增厚,有少量出血和渗出;3分,肠道弥漫性出血;4分,肠道严重出血或有肠芯。
病变值=每组鸡肠道平均病变记分×10
2.3.3卵囊值(OPG值):OPG值即每克粪便中的卵囊值数(柔嫩×106)
当OPG值为0~0.1时,卵囊值为0;
当OPG值为0.1~1.0,卵囊值为1;
当OPG值为2.0~5.0时,卵囊值为10;
当OPG值为6.0~10.0时,卵囊值为20;
当OPG值为≥11.0时,卵囊值为40;
2.4.4 成活率(%)=(各组成活鸡数÷各组试验鸡数)×100%
2.4.5 增重率(%)=(试验结束后平均体重-试验开始平均体重)÷试验开始平均体重×100%
相对增重率(%)=(用药组或感染不用药组的增重率÷不感染不用药组的增重率)×100%
2.4.6 抗球虫指数(ACI)=(成活率+相对增重率)-(病变值+卵囊值) 根据ACI来判定药物的抗球虫疗效。ACI≥180者,判定为高效抗球虫药;ACI为160-180者,判定为中效抗球虫药;ACI为120-160者,判定为低效抗球虫药;ACI<120者,判为无效抗球虫药。
3 结果
3.1 临床症状 感染球虫孢子化卵囊后第5 d,各攻球虫组为出现血便现象,但鸡只表现为精神萎靡、食欲减退、羽毛松乱、翅膀下垂,缩颈闭眼等症状。第6 d,除不感染不给药和西药组未曾出现血便外,其余各组都出现血便,用药组第7 d,血便有所减轻,鸡群食欲正常,不感染不给药组无血便,鸡只采食正常,精神状态良好。
3.2血便值 详见表2。血便计分是一个评判球虫病发生及发病程度的指标,由表2血便计分来看,酵母菌发酵中药复方组的血便明显低于乳酸菌、芽孢菌发酵复方组、中药组、感染不给药组,略高于西药地克珠利组。
表2 血便值
|
组别 |
处理 |
5 d |
6 d |
7 d |
平均血便 计分 |
|
Ⅰ |
不感染不给药 |
0 |
0 |
0 |
0 |
|
Ⅱ |
感染不给药 |
0 |
3 |
2 |
1.667 |
|
Ⅲ |
西药 |
0 |
0 |
1 |
0.333 |
|
Ⅳ |
中药复方 |
0 |
2 |
1 |
1 |
|
Ⅴ |
乳酸菌发酵复方 |
0 |
3 |
2 |
1.667 |
|
Ⅵ |
芽孢菌发酵复方 |
0 |
2 |
1 |
1 |
|
Ⅶ |
酵母菌发酵复方 |
0 |
1 |
1 |
0.667 |
注:表中数字表示每d每羽血便计分
3.3 存活率、卵囊值、病变值和相对增重率 详见表3。感染不给药组的相对增重率和存活率远低于给药各组,酵母发酵中药复方组存活率和相对增重率与西药组差别不大,病变值较低,卵囊值最低。说明酵母发酵中药和西药对抗球虫感染均有很好的防治效果。
3.4 药物抗球虫效果 详见表3。ACI是一个综合评价抗球虫药物疗效的重要指标,根据判断标准可知,各组鸡只抗球虫效果普遍不好(西药组ACI仅为115.2)。但从抗球虫指数的大小来看,酵母发酵组ACI 为109.2,略低于西药组,远远高于中药组、乳酸发酵、芽孢发酵和感染不给药等组。
表3 药物抗球虫指数(ACI)评定结果
|
组别 |
处理 |
相对增重率% |
存活率% |
病变值 |
卵囊值 |
ACI |
|
Ⅰ |
不感染不给药 |
100.0 |
100 |
0 |
0 |
200.0 |
|
Ⅱ |
感染不给药 |
54.2 |
60 |
26 |
40 |
48.2 |
|
Ⅲ |
西药 |
80.2 |
90 |
15 |
40 |
115.2 |
|
Ⅳ |
中药复方 |
76.3 |
70 |
28 |
40 |
78.3 |
|
Ⅴ |
乳酸发酵复方 |
60.4 |
70 |
27 |
40 |
63.4 |
|
Ⅵ |
芽孢发酵复方 |
74.8 |
50 |
30 |
40 |
54.8 |
|
Ⅶ |
酵母发酵复方 |
74.2 |
80 |
25 |
10 |
109.2 |
注:ACI在180以上为优秀,160~180为良好,120~160为差,120以下为无效。

4 讨论
鸡球虫寄生于肠道上皮细胞,在肠道内繁殖,破坏肠粘膜的完整性,引发粘膜上皮细胞崩解,使肠道内离子和渗透压失去平衡,营养物质不能吸收,且大量出血,肠粘膜的完整性被破坏,继发感染,临床上发病鸡表现为精神沉郁、下痢、贫血等症状,甚至死亡[3-4]。在中兽医领域,鸡球虫病属于虫积范畴,用中药治疗虫积,在我国有着悠久的历史。早在公元前二世纪的《神农本草经》上就有“牛扁杀虫虱子、柳叶治马疾”的记载;明代的《元亨疗马集》详细记载了“硫黄,贯众……”等12味道杀虫治疗的中草药[5]。中草药防治鸡球虫病多从杀虫、抑虫,增强机体免疫力,缓解临床症状三方面来发挥作用。马鞭草活血散瘀,截疟,解毒,利水消肿,对球虫有抑虫、杀虫作用。研究报道,以马鞭草和白头翁为主要成分的中药复方制剂,抗球虫效果明显,在饲料中添加一定量的上述中药方剂,预防柔嫩艾美尔球虫其抗球虫指数(ACI)在135~197,抗球虫效果明显[6]。黄柏,清热,燥湿,泻火,解毒,治热痢,也可抑杀球虫,凉血缓解临床症状等。郁金,行气解郁,凉血破瘀,可缓解临床症状。有学者研究中药球康对鸡球虫病的防治及作用机理的研究,发现由马鞭草、黄柏、郁金等制成的中药超微粉2%拌料给药组和1%拌料给药组抗球虫指数分别为175.96和166.89,具有很好抗球虫效果[7]。中草药经发酵后,其有效成分能被充分分离、提取,使其更具有生物活性,并含有大量活性酶,服用后能被机体组织细胞迅速吸收,达到祛病、增强免疫调节的功能,更好的发挥中草药这一天然药物的药效作用[8]。本研究就采用益生菌发酵中药的方法,但由于鸡只攻毒剂量较高,达到每只鸡接种1.5×105个卵囊,导致感染不给药组死亡率较高达60%,,西药组的抗球虫指数也仅为115.2,直接导致血便、增重率、卵囊值、病变值和ACI都普遍偏低。但酵母发酵复方无论从血便、相对增重率,还是卵囊值、抗球虫指数等,都显示出了与西药相当的疗效,倘若攻毒剂量降低,估计试验效果会更好,发酵中草药还是显示出了很好的应用前景。
由以上结果可以看出,以驱虫、杀虫为主,以凉血止血为辅的中药复方制剂,经产朊假丝酵母发酵后对鸡柔嫩艾美耳球虫病有一定的疗效。