来源：博恩脑科学

本图文主要介绍在体多通道微丝阵列植入手术所需器材，手术步骤以及注意事项。

1 手术器材

麻药、剃毛工具、手术刀、眼科镊、眼科剪、棉签、3%双氧水，16通道微丝阵列电极、立体定位仪、颅钻、钻头（0.8mm）、螺丝钉（M1.0xL2.0mm）、螺丝刀（45*1mm）、石蜡（固液1:1混合）、生理盐水、牙托粉水（义齿基托聚合物，自凝型）、牙科洁治器、抗生素。

2 术前准备工作

1. 确定目标脑区坐标 确定目标脑区位点通常有两种策略：a. 通过使用立体定位图谱，寻找目标脑区具体位置，读取目标脑区深度，矢状、管状坐标，确定目标脑区坐标数值。b. 通过阅读参考文献，获取方法中涉及脑区的坐标。文献中坐标常用标注：AP anteroposterior 前囟前后ML mediolateral 中逢 左右DV dorsoventral 颅骨（硬脑膜）平面向下（需要注意文献中坐标选取的Z轴参考点。通常参考点包括Bregma点、脑膜表面、颅骨表面的Z轴读值。）
2. 器具消毒、仪器检查 使用酒精擦拭手术器械，并对电极尖端进行酒精消毒。检查立体定位仪，确保定位仪刻度置零，可以正常工作。
3. 实验动物准备 选取实验动物检查其健康状况，并进行体重称量。

3 植入前准备

1. 通过4%高浓度异氟烷进行诱导麻醉，待小鼠完全进入麻醉状态后，立即转移至立体定位仪进行固定，维持麻醉浓度约1-1.5%，气流量300-500ml/min。（大鼠维持麻醉浓度约2-2.5%，气流量500-700ml/min；亦可根据实验动物体重计算液体麻醉剂使用剂量，并通过腹腔注射进行麻醉。待实验动物失去疼痛反射后，开始进行实验；部分麻药会抑制神经元放电，影响术中同步信号观察。）
2. 将小鼠颅顶两耳连线及两眼连线间的毛发剪除，暴露出颅面皮肤，并使用碘伏进行消毒。眼部涂抹眼胶，保护小鼠视力免受损伤。
3. 使用眼科剪刀剪去颅骨顶部皮肤，剪除区域为两耳连线至两耳连线之间。使用棉签蘸取双氧水清洁颅骨表面，凸显骨缝及标志点。
4. 为了保证定位准确，需利用立体定位仪测量前卤（Bregma）后卤（Lambda）的水平高度以及左右脑水平高度，并进行调平。

4 电极植入及固定

1. 利用立体定位仪进行目标脑区定位，并用记号笔进行位点标记。
2. 使用牙科钻进行开窗，操作过程中应避免连续打磨造成局部高温损伤。
3. 在目标植入脑区进行颅钉孔钻制，颅钉的主要功能为地线、EEG电极的固定和记录。颅钉植入深度约0.5mm左右，避免过深压迫大脑，过浅固定不牢固。
4. 使用弯折后的注射器针头挑除硬脑膜，操作过程中尽量小心，避免造成大量出血和皮层损伤，影响后续记录。（如遇出血可以使用止血海绵进行止血处理。）
5. 清洁目标脑区上皮层表面后开始电极植入操作，首先将电极移至皮层表面后进行地线缠绕，避免植入后缠绕动作扰动电极损伤大脑。（亦可在电极植入到目标脑区后通过快速焊接完成地线与颅钉间的连接。）
6. 地线缠绕后，通过立体定位仪缓慢将电极植入大脑，待电极进入皮层后，在电极周边滴加生理盐水溶解包裹在电极周围的PEG聚乙二醇，同时可以保持暴露脑区湿润。
7. 电极极植入速度不宜过快（50-100μm/min），给予脑组织足够长的形态恢复时间，避免大脑回弹不及时压迫脑组织，影响神经元活性及后期记录效果。
8. 待电极下植至目标脑区后，利用石蜡进行快速适温融化覆盖在暴露大脑区域，以此保护暴露的脑组织免受固定所用牙科水泥刺激。
9. 用生理盐水溶解包裹电极的剩余PEG，并利用牙科水泥对整个电极进行固定。牙科水泥应该避免直接黏连皮肤，这样可以减缓皮肤增生对电极的影响。

5 术后护理与信号记录

1. 电极固定后，将小鼠从立体定位仪上取下，并在创口周围涂抹抗生素软膏，避免外伤感染。
2. 将小鼠放置于35℃恒温加热垫上保温，待恢复活动后放回记录桶进行单独饲养。（术后小鼠应置于饲养桶中进行单独饲养，可以避免相互之间啃食电极。同时也可以避免小鼠在饲养笼中活动，导致头部电极频繁撞击笼盖，影响电极稳定，过早松弛脱落。）
3. 恢复期间，每日抓取小鼠进行抚触2-3分钟，并进行电极抓持模拟操作，使其对headstage插拔动作进行适应。
4. 术后恢复一周，可以进行在体神经信号数据采集。