一、移液器的选择原则
1. 学生实验常用的移液器的规格(最大量程)一般为 2.5μl、10μl、20μl、50μl、100μl、200μl 和1000μl。通常来说,移液器的可用量程范围是移液器最大量程的 10%~100%,即上述各移液器的可用量程范围分别是 0.25~2.5μl、1~10μl、2~20μl、5~50μl、10~100μl、20~200μl、100~1000μl。而移液器的最佳使用量程范围是其最大量程的1/3 到其最大量程,因此上述各移液器的最佳使用量程范围分别是 0.7~2.5μl、3~10μl、6-20μl、16~50μl、33~100μl、66~200μl、330～1000μl。
2. 按照上述移液器的可用量程范围和最佳使用量程范围,在实验过程中根据移液量的多少选择合适的移液器。对于同一支移液器,一般随着其移液量的变小,其精度也越来越小,一般说来,当移液量为最大量程的50%时,其精度比最大量程时略小,但变化不大;当移液量为最大量程的 10%时,其精度与最大量程时相比会差很多。例如,对于最大量程为20μl、200μl 和1000μl的移液器,当在最大量程点使用时,准确性(土%)一般都在1左右,重复性(≤%)一般是 0.1~0.3;而当在10%量程点使用时,准确性(±%)一般是3~8,重复性(≤%)一般是 0.5~2。因此,当移液量为 10μl 时,最好选择 10μl 和/或 20μl或 50μl 的移液器,而不要选择 100μl或 200μl 的移液器;当移液量为 100μl时,最好选择100μl和/或 200μl 的移液器,而不要选择 1000μl 的移液器;以此类推。
二、移液器的使用方法
1. 移液器的基本结构如图 1-1 所示。
2. 设定体积方法
(1)粗调;通过调节旋钮将容量值迅速调整至接近所需的设定值(图 1-2a);
(2)细调:当容量值接近设定值以后,应将移液器刻度显示窗平行放至自己的眼前,通过调节旋钮慢慢地将容量值调至设定值(图 1-2b),从而避免视觉误差所造成的影响;
(3)设定容量值时的注意事项如图 1-3 所示。
图 1-3 体积调节旋钮使用方法
大体积→小体积:逆时针(图 1-3a)。
小体积→大体积:顺时针超过设定刻度,再回调(图 1-3b),保证最佳的精确度。
3. 装枪头
(1)散装枪头的安装方法:将移液器竖直插入枪头,左右微微转动,上紧即可,如图1-4所示。
(2)盒装枪头的安装方法:将移液器竖直插入枪头中,稍用力下压,然后旋转即可,如图1-5 所示。
4. 吸液
(1)垂直吸液,枪头尖端需浸入液面 2~4mm 以下。若溶剂瓶中液体太少,请倒入 EP管中,方便吸取。
(2)枪头预润湿(3次),枪头内壁会吸附一层液体,使表面吸附达到饱和,然后再吸入样液,最后打出液体的体积会很精确。
(3)慢吸,控制好弹簧的伸缩速度,吸液速度太快会产生反冲和气泡,导致移液体积不准确。
(4)将移液器提离液面,停约 1s。观察是否有液滴缓慢地流出,若有流出,说明有漏气现象,原因可能是枪头未上紧或移液器内部气密性不好。
(5)若有外壁残留,用滤纸蘸擦枪头外面附着的液滴。
5. 放液
(1)将枪头口贴到容器内壁并保持 10°~40”倾斜。
(2)平稳地把按钮压到一挡,停约 1s后压到二挡,排出剩余液体;排放致密或黏稠液体时,压到一挡后,多等1~2s,再压到二挡。
(3)压住按钮,同时提起移液器,使枪头贴容器壁擦过,再松开按钮。
(4)按弹射器除去枪头(吸取不同液体时需更换枪头)。
(5)使用完毕,调至最大量程。移液器长时间不用时建议将刻度调至最大量程,让弹簧恢复原形,以延长移液器的使用寿命。
6. 移液器使用的注意事项
(1)当移液器枪头内有液体时切勿将移液器水平或倒置放置,以防液体流人活塞室腐蚀移液器活塞。
(2)如液体不小心进入活塞室,应及时清除污染物。
(3)平时检查是否漏液的方法:吸液后在液体中停1~3s,观察枪头内液面是否下降。
如果液面下降,首先检查枪头是否有问题,如有问题更换枪头;更换枪头后液面仍下降说明活塞组件有问题,应找专业维修人员修理。
(4)吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指,绝不允许突然松开,以防溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。
(5)卸掉的枪头一定不能和新枪头混放,以免产生交叉污染。