水产过硫酸氢钾会杀灭有益菌吗 (过硫酸氢钾水产养殖的作用)

文/西南大学（荣昌校区）鱼类繁殖与健康养殖中心

引言：过硫酸氢钾复合盐虽然在水产上应用很久，但针对相关细菌缺少对应数据。2016年，连云港永荣生物科技有限公司委托相关院校做出两篇相应数据，希望对同行及相关养殖户有所借鉴

摘要：不同浓度条件下，试验了过硫酸氢钾对5种水产动物常见病原菌，包括柱状曲挠杆菌、荧光假单胞菌、嗜水气单胞菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌的药物敏感性。结果表明：过硫酸氢钾对这几种病原菌的MIC为3.1~5.7mg/L之间，MBC为4.5~8.3mg/L之间。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1菌种

试验菌株选择水产养殖鱼类的常见致病菌，试验菌株取自农业部渔业动植物病原库。

G4柱状曲挠杆菌Flexibactercalumnaris
56-12-10荧光假单胞菌Pseudomonasfluorescens
ST78-3-3嗜水气单胞菌A.hydrophilahydrophila
58-20-9副溶血弧菌Vibrioparahemolyticus
BYK00056-11-24溶藻弧菌Vibrioalginolyticus

1.1.2试验药品

试验药品＂过硫酸氢钾＂本试验所使用的过硫酸氢钾由连云港永荣生物科技有限公司提供，具体产品信息见表1。

表1 过硫酸氢钾产品信息

编号

产品名称或公司名字

有效成分含量（%）

剂型

德国某公司

50%

粉剂

福建某公司

50%

粉剂

美国某公司

50%

粉剂

上海某公司

50%

粉剂

浙江某公司

50%

粉剂

浙江某公司

50%

颗粒

福建某公司

50%

颗粒

上海某公司

50%

颗粒

连云港永荣

50%

片剂

S10

连云港永荣

50%

粉剂

1.1.3培养基

选用肉汁胨培养基：蛋白胨10g，牛肉膏5g，NaCl5g，H2O1000mL，pH7.2～7.4，1.05kp灭菌20min。

1.2方法

1.2.1菌悬液的制备

将各菌株接种到已灭菌的培养基上，培养24－48h后刮取菌苔，置于无菌生理盐水中摇匀，离心2次(4500r／min，每次20min)，收集沉淀，重悬于无菌生理盐水中，参照麦氏比浊管将菌液稀释到约107CFU／mL。

1.2.2药液配制

过硫酸氢钾用无菌水稀释1000mg/L备用。

1.2.3抗菌效果试验

1.2.3.1药物敏感性试验

药敏试验采用滤纸片法，根据抑菌圈的大小，来判断菌种对药物的敏感性，是敏感，中度敏感还是耐药。干燥纸片的制备方法：选用吸水力强而且质地均匀的滤纸，用打洞机制成6mm直径的圆纸片，120℃干燥灭菌2小时。然后把配制好的各种适宜浓度的药液，每100张纸片加入1.0mL药液，使它均匀浸润，放在无菌平皿中，37℃使它干燥，分装小瓶中并封口，4℃保存。采用平板扩散法将培养的试验菌株以无菌水制成约106CFU／mL的菌悬液，移取100µL菌悬液至肉汁胨固体培养基上，推样器推匀，稍干后镊取无菌圆纸片贴放于接种过试验菌株的平皿培养基表面，使每片含100µg的药物，28℃恒温培养24h后，游标卡尺测量抑菌圈直径(郑钧镛等，1989)，见表2。

1.2.3.2最小抑菌浓度(MIC)测定试验

使用试管稀释法。吸取预先配制好的药物母液1mL，加入灭菌试管中，加无菌水至9mL，每一试管再移取菌悬液1mL(预先培养18h，浓度约为107cfu／mL)，混匀，28℃恒温培养，24h后每管移取1mL至9mL无菌肉汁胨液体培养基内培养，肉眼观察，含最小量尚呈明显不混浊的试管所含药物的浓度为最小抑菌浓度(MIC)，见表3，4。

1.2.3.3最小杀菌浓度(MBC)测定试验

按液体培养基稀释法的操作方法测了药物的MIC，然后把未长出菌的各个试管培养液分别移种到无菌平板上，培养后凡是平板上无菌生长的药物最低浓度就是最小杀菌浓度（MBC），见表4。

2结果

2.1过硫酸氢钾对不同病原菌的敏感性

表1 不同细菌对过硫酸氢钾的敏感性

药物浓度（mg / L）

柱状曲挠杆菌

荧光假单胞菌

嗜水气单胞菌

副溶血弧菌

溶藻弧菌

抑菌圈直径

敏感性

抑菌圈直径

敏感性

抑菌圈直径

敏感性

抑菌圈直径

敏感性

抑菌圈直径

敏感性

7.1

28.7

22.6

23.4

17.6

14.5

5.6

20.7

18.2

18.3

12.3

8.7

4.2

15.8

14.3

12.9

8.4

3.1

6.0

25.1

26.2

21.4

22.3

19.8

4.7

22.4

21.3

18.5

19.8

15.6

3.3

16.4

15.7

16.3

14.6

12.8

2.5

7.0

29.7

25.2

21.2

19.7

16.7

5.4

26.4

22.1

17.3

12.8

13.4

4.3

21.0

18.0

13.7

8.5

9.1

3.4

7.5

28.9

23.5

19.7

16.5

17.4

6.3

24.5

15.1

14.5

11.9

13.7

5.1

8.7

4.0

6.4

23.8

24.5

23.4

16.4

17.5

5.3

21.4

20.6

18.7

12.7

13.6

4.3

3.4

6.4

23.1

22.8

20.9

21.4

21.8

5.3

18.5

17.6

17.4

13.8

13.1

4.3

13.4

12.3

13.5

3.4

6.0

20.5

22.7

20.7

21.8

20.4

4.7

17.4

17.8

18.3

17.6

17.1

3.3

12.8

14.6

13.4

11.8

12.4

2.5

7.5

21.5

25.4

23.7

18.7

17.8

6.3

16.7

18.7

17.6

13.2

11.5

5.1

13.5

12.5

4.0

6.0

22.8

23.7

18.9

20.7

18.3

4.7

15.9

20.5

17.4

16.7

16.8

3.3

8.4

17.5

13.5

12.5

13.5

2.5

S10

6.0

20.4

18.7

22.5

23.7

28.4

4.7

17.6

14.6

20.4

18.0

22.0

3.3

11.5

13.2

13.8

13.1

14.8

2.5

注：S－敏感；R－不敏感。

2.2对几株细菌的最小抑菌浓度（MIC）试验

过硫酸氢钾对5株细菌的抑菌试验结果。“+/-”表示，2个平行组中1个为“+”、1个为“-”；“+”或“-”表示，2个平行组的结果相同，同为“+”或“-”，“+”表示有细菌生长，而“-”表示无细菌生长。每种病原菌的每个浓度梯度均设1个不加药物的阴性对照，以便于区别浑浊是由细菌繁殖造成还是药物本身产生的浑浊，抑或细菌由于其它原因造成了死亡（表2）。

表2 过硫酸氢钾对几株细菌的杀灭效果（mg / L）

药物浓度（mg / L）

柱状曲挠杆菌

荧光假单胞菌

嗜水气单胞菌

副溶血弧菌

溶藻弧菌

7.1

+/-

6.1

5.2

+/-

4.5

3.2

7.1

6.1

5.2

4.5

3.2

7.1

+/-

6.1

5.2

+/-

4.5

+/-

3.2

7.1

+/-

6.1

5.2

+/-

4.5

3.2

7.1

6.1

5.2

+/－

4.5

3.2

7.1

6.1

5.2

+/-

4.5

3.2

7.1

6.1

5.2

+/-

4.5

3.2

7.1

6.1

+/-

5.2

4.5

3.2

7.1

6.1

5.2

4.5

3.2

S10

7.1

6.1

5.2

4.5

3.2

过硫酸氢钾对柱状曲挠杆菌等的MIC值见表3。

表3 过硫酸氢钾对几株细菌的最小抑菌浓度（MIC)（mg / L）

编号

柱状曲挠杆菌

荧光假单胞菌

嗜水气单胞菌

副溶血弧菌

溶藻弧菌

3.7

4.2

3.8

4.9

5.1

3.1

3.5

3.8

4.0

4.2

3.8

4.3

4.5

4.8

5.1

5.8

3.6

4.8

4.6

4.7

5.7

4.8

4.7

4.6

3.4

4.8

3.6

4.9

5.2

3.6

4.9

3.5

3.8

3.4

4.8

3.4

3.8

5.6

5.7

3.5

3.7

3.6

3.8

3.7

S10

3.3

3.4

3.2

3.8

4.0

2.3对几株细菌的最小抑菌浓度（MBC）试验

过硫酸氢钾对柱状曲挠杆菌等的MBC值见表4。

表4 过硫酸氢钾对几株细菌的最小杀菌浓度（MBC）（mg / L）

编号

柱状曲挠杆菌

荧光假单胞菌

嗜水气单胞菌

副溶血弧菌

溶藻弧菌

5.6

6.3

5.7

7.4

7.7

4.5

5.3

5.7

6.0

6.1

5.7

6.5

6.8

7.5

7.7

8.7

5.4

7.2

6.4

7.1

8.6

7.2

7.1

6.9

5.1

7.1

5.8

7.4

7.5

5.4

7.4

5.3

5.7

5.1

7.2

5.1

5.7

8.3

8.0

5.3

5.6

5.4

5.7

5.6

S10

5.0

5.1

4.8

5.7

6.0

3结论

过硫酸氢钾对水产动物常见病原菌有较强的抗菌力，过硫酸氢钾对试验的5种病原菌的MIC为3.1~5.7mg/L之间，MBC为4.5~8.3mg/L之间。

此试验数据表明连云港永荣生物科技有限公司的50%片剂及粉剂在抑菌圈及最小杀菌、抑菌浓度上都表现了极好的效果，这也表明了复合过硫酸氢钾配方的重要性。

如有相关问题，可咨询连云港永荣生物科技有限公司赵经理15821078956。